检验检测

12．3  叶绿酸铜钠

Sodium Copper Chlorophyllin

1．性状

本品为蓝黑色的粉末，无嗅，或稍有特异的臭气①。

2．鉴定试验

（1）在本品的强热残留物中，加稀盐酸10mL，在水浴上加热溶解。溶液不透明时过滤，加水至10mL做为检液，进行如下的试验。

（i）检液，进行焰色反应试验时，开始呈现绿色，然后呈现黄色②。

（ii）取5mL检液，加二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液（1→1000）0.5mL，产生褐色的沉淀③。

（2）将本品0.1g溶在水中至1000mL取其10mL加磷酸缓冲液（pH值7.5）至100mL，此溶液在波长404~406nm及629~631nm有最大吸收峰，分别在最大吸收波长处测吸光度A1及A2，A1/A2是3.7±0.3④。

3．纯度试验

（1）酸碱性  本品水溶液（1→100）的pH值用玻璃电极法测定是9.5~10.7。

（2）比吸光度  精确称量本品0.1g，溶在水中至1000mL，取10mL，加磷酸缓冲液（pH值7.5）至100mL，此液在波长405nm附近的最大吸收峰处，测定吸光度，换算成干燥物时， =508~568。但此操作要避开直射光，用遮光容器进行⑤。

（3）砷  将本品0.5g及无水碳酸钠0.3g加到瓷皿上，加溴·溴化钾试液1mL，充分混和，水浴加热至干后，约加温到400℃，灰化。冷后在残留物上加溴·盐酸试液2mL，加水至10mL。取5mL，做检液，进行砷的常规试验，砷含量应符合要求。但对照溶液，取砷标准溶液2mL及无水碳酸钠0.3g到瓷皿中加溴·溴化钾试液1mL，以下和试样进行同样操作。

（4）碱性焦油色素  取本品5mL水溶液(1→200)加氢氧化内溶液（1→50）1mL及乙醚50mL，混和振荡，除去水层。将乙醚层用氢氧化钠溶液（1→50）15mL洗2次后，在乙醚层加醋酸溶液（1→10）5mL混和振荡，水层应是无色⑥。

（5）酸性焦油色素  取本品的水溶液（1→300）0.01mL做检液，用正丁醇、冰醋酸及水的混液（4：1：2）做展开剂，进行纸层色谱分离法第2法时，在自然光下，在滤纸的一个圆型色带外没有发现斑点。但是滤纸用色谱分离法滤纸1号时，展开剂跑至离中心约5cm距离时停止展开。不用对照液⑦。

（6）无机铁盐及无机铜盐（5）中得的滤纸上喷雾亚铁氰化钾溶液（1→100）及二乙基氨荒酸钠溶液（1→100），不应产生蓝色或淡褐色的斑点⑧。

4．干燥失重

本品在105℃干燥2h，失重应在5%以下。

5．强热残留物

本品在105℃干燥1h后，进行强热残留物的试验，其量应在37%以下⑨。

注  解

①由于粒度不同，可变成结晶性粉末或粉末。由于喷雾干燥变成粉末，没有金属光泽。本品在干燥状态稳定。有吸湿性，在吸湿状态长期保存，变质不易溶于水。本品易溶于水，在乙醇氯含水量微溶。在乙醚，石油醚中几乎不溶。

②是钠的试验。

③是铜的试验。

                           （褐色）

④以前规定最大吸收峰405nm及630nm波长处，分光光度计仪器差考虑在内，分别订为405±1nm及630±1nm。

⑤加热变质，溶解在磷酸缓冲液（pH值7.5）后吸光度值慢慢减少，所以检液调制后，应尽快测定吸光度。由于得到的叶绿酸铜钠的 及干燥失重得到的数量，换算成对应干燥物的 。

⑥在碱性下，用乙醚抽提碱性焦油色素，加醋酸制成碱性焦油色素的醋酸盐，使其从乙醚溶液转溶到水中。加孔雀绿草酸盐时，检出量为25μg。

⑦展开液的pH值约是2.4，叶绿酸铜钠变成叶绿酸铜，跑在溶剂的前端。一般使用的黄、蓝及绿色的焦油色素的Rf在0.1~0.65之间，没有跑在溶剂前端的。加入日内瓦绿B，可检测出0.1μg。试验中使用的圆形滤纸，在以后铜、铁的试验中也使用，所以要用铜、铁含量少的色谱分离法纸法1号为好。

⑧由于亚铁氰化钾溶液，Fe3+呈现蓝色，Cu2+不显色。由于二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液，Cu2+呈现淡褐色。检测限量铁是0.03μg，铜是0.01μg。

⑨非碳化时加硫酸加热，试样飞散，可能有损失。叶绿酸铜α钠C34H30O5N4CuNa2，分子量684.17，叶绿酸铜b钠C34H28O6N4CuNa2分子量698.15，所以对应于叶绿酸铜钠的平均分子量=（684.17×13+698.15）/4=687.17的强热残留物（CuSO4+Na2SO4）的理论值43.87%。实测值是30.8%、31.5%、25.9%、35.6%、35.5%。