检验检测

12．2  叶绿素铜

Copper Chlorophyll

1．性状

本品为暗绿色的块、片、粉末或粘稠状的物质，有特异的臭气①。

2．鉴定试验

（1）取本品1g加水或稀乙醇5mL混和振荡时溶液不呈色②。

（2）将本品10mg溶在50mL乙醚中，加氢氧化钠·甲醇溶液（1→100）2mL混和振荡，水浴蒸馏，加热30min，冷却后每次用水10mL抽提3~5次，提取液合在一起，加磷酸缓冲液（pH值7.5）至200mL，此溶液在波长404~406nm及629~631nm处有最大吸收峰）在最大吸收波长处测吸光度A1及A2，A1/A2是3.7±0.3③。

（3）在本品的强热残留物中，加稀盐酸10mL，水浴加热溶解。溶解不透明时过滤，加水至10mL，作为检液进行如下试验。

（i）在5mL检液中，加氨水调成碱性溶液呈现蓝色④。

（ii）在5mL检液中，加二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液(1→1000)0.5mL，产生褐色的沉淀⑤。

3．纯度试验

（1）比吸光度  精确称取量本品约10mg，溶于50mL乙醚中，加氢氧化钠、甲醇溶液（1→100）2mL混合振荡，水浴蒸馏加热30min，冷却后每次用水10mL抽提3~5次，将抽提液合在一起，加磷酸缓冲液（pH值7.5）至200mL，在波长405nm附近的最大吸收部测定吸光度时， =62以上。此操作避开直射日光，用遮光容器进行⑥。

（2）砷  按“叶绿酸铜钠”的纯度试验（3）进行。

（3）碱性焦油色素  取本品的乙醚溶液（1→200）5mL加醋酸1mL及水5mL，混合振荡后在用水湿润的滤纸上常压过滤，乙醚层残留在滤纸上时，滤液应是无色的⑦。

（4）酸性焦油色素  无机铁盐及无机铜盐按“叶绿酸铜钠”的纯度试验（5）及（6）进行，但是检液用丙酮溶液（1→300）约0.01mgL⑧。

4．干燥失重

本品在105℃干燥2h，失量应在3%以下⑨。

5．强热残留物

本品在105℃干燥2h后，精确称取本品约1g，缓慢加热炭化，冷后，对其残留物进行强热残留物的试验时，其量原在2.2%以上⑩。

注  解

①本品在乙醇、乙醚、石油醚中溶解。在水及50%乙醇中不溶。

②是叶绿酸铜的试验。混有叶绿酸铜时溶液呈蓝绿色。

③把叶绿素铜加水分解，鉴定叶绿酸铜钠。

④是铜的试验。

Cu₂++4NH₃ Cu(NH₃)₄²⁺(深蓝色)

⑤是铜的试验。

（褐色）

⑥1mol叶绿素铜加水分解成1mol的叶绿酸铜钠。叶绿素铜是叶绿素铜α和叶绿素铜b的混合物，a:b的比为3:1，可求出平均分子量，以此做为标准进行计算。从叶绿素铜αc55H72O5N4Cu分子量932.75，叶绿素铜b C55H70O6N4Cu分子量946.74求出叶绿素铜的平均分子量=（932.75×3+946.74）/4=936.56。

叶绿素铜（平均分子量936.5）的1%溶液对应叶绿酸铜钠（平均分子量687.67）的0.734%溶液。从叶绿酸铜钠的比吸光度 =565，得 =415，此值对应叶绿素铜的1%溶液。

例：取试样10.57mg，加水分解得的叶绿酸铜钠溶液的吸光度如是0.397，试样浓度从200mL中含试样10.57mg，变为0.00528%，叶绿素铜变成 =0.379/0.0052×1=71.78。从此值和对应叶绿素铜1%溶液的叶绿酸铜钠溶液的比吸光度 =415，叶绿素铜含量变为71.78×100/415=17.29%。

以前规定 =429（60%叶绿素铜）以上，可是要想从天然原料得到这样高纯度的制品，必须用特殊的精制法，在工业生产品中一般叶绿素铜的含量是15%以上，所以变成 =62以上。实测值 =83，65，70，75，72，64，70及74。

⑦碱性焦油色素，生成醋酸盐溶在水中。把这水层部分过滤，观察其颜色。在本品中加入孔雀绿可检测出0.35μg。

⑧检测限量铁是0.04μg，铜是0.02μg，加入日内王永瓦绿B时可检测含0.1μg样品。

⑨以前规定是1.5%，可是结合工业生产品的实情改为3%以下。

⑩非碳化物加硫酸加热时，试样飞散，可能有损失。从叶绿素铜平均分子量=936.50计算强热残留物CuSO₄（分子量（159.60）的理论值是17.04%。