检验检测

3．9  5’-胞苷酸钠

Sodium 5’-胞苷酸钠

分子式C₉H₁₂N₃Na₂O₆P                                                 分子量367.17

本品在定量时含胞苷-5’-磷酸二钠（C₉H₁₂N₃Na₂O₈P）97~102%。

1．性状

本品是无色~白色的结晶或白色的结晶性粉末，有特殊的味道①。

2．鉴定试验

（1）取本品20mg，加0.01mol/L盐酸定容至100mL，取10mL，加0.01mol/L盐酸定容至100mL的溶液在279±2nm外有极大吸收峰②。

（2）取本品的水溶液（3→10，000）3mL，加盐酸1mL和溴试液1mL，在水浴上加热30min后吹入空气，除去溴，加5-甲基苯二酚的乙醇溶液（1→10）0.2mL，然后加硫酸铁铵盐酸试液3mL，水浴上加热20min呈绿色③。

（3）取本品的水气液（1→20）5mL，加镁试液2mL，不生成沉淀，但再加硝酸7mL，煮沸10min后，加氢氧化钠试液使其中和，呈磷酸盐的常规鉴定试验反应④。

（4）本品呈钠盐的常规鉴定试验反应⑤。

3．纯度试验

（1）溶解性  将本品0.5g溶于10mL水时是无色的，其浊度基本在规定的透明度以下。

（2）酸碱性  本品的水溶液（1→20）的pH值用玻璃电极法测定时，应是8.0~9.5。

（3）铵盐  将本品0.1g装入小试管中，加氧化镁50mg和水1mL，在试管内挂好用水润湿的红色石蕊试纸，封盖试管口，在水浴上加热5min，石蕊试纸不应变蓝⑥。

（4）钾  将本品1g溶于5mL水，以此为检液，进行砷的常规试验时，应符合要求⑦。

（5）重金属  将本品1g装入坩埚中，加硫酸铵1g盖住本品，然后加入水0.5mL，静置，加热进行炭化，不发生白烟后，进行强热、灰化。加硫酸、硝酸各3滴，徐徐加热灰化，冷却后在残留物中加稀醋酸2mL，和水至50mL，必要时可进行过滤，将此液作为检液，进行重金属试验时，其量应在0.001%以下⑧。

（6）氨基酸  取本品水溶液（1→1，000）5mL，加茚三酮试液1mL，加热3min时不应呈色⑨。

（7）吸光度比  测定本品的0.01mol/L盐酸溶液（1→50，000），在波长250nm，260nm和280nm外的吸光度为A1、A2和A3。A1/A2应是0.4~0.52，A3/A2应是1.85~2.2⑩。

（8）其它核酸分解物  可用“5’-肌苷酸钠”的纯度试验（8） 。

4．水分

精确称取本品500mg，进行水分的定量时，其量应在26%以下。但是，需将试样装入干燥滴定用容量瓶中，加费歇尔滴定法用甲醇10mL、密封、放置1h后，加一定量费歇尔试液（约10mL）使其过剩约10mL，密封，混合振荡5min后，边激烈振荡，边用水、甲醇标准溶液滴定。另外可用同样方法进行空白试验。

5．定量法

精确地称取本品500mg左右，溶于0.01mol/L盐酸，定容至1,000mL，取10ml/L盐酸，定容至1，000mL，取10mL，加0.01mol/L盐酸，定容至250mL，作为检液。0.01mol/L盐酸做为对照，用液层厚1cm于波长280nm处测定检液的吸光度，根据下式可求出胞苷-5’-磷酸二钠的含量 。

注  解

①本品易溶于水，微溶于甲醇，几乎不溶于乙醇。本品的呈味力与嘌呤核苷酸相比非常弱。

②是根据紫外吸收光谱来确认。本品的0.01mol/L盐酸溶液显示在λmax：279±2nm处有吸收，其分子吸光系数为12,700。胞苷和本品有相同的紫外吸收光谱。

③本品与嘌呤核苷酸不同，只在盐酸中加热不能使核糖游离，因此有必要利用溴试验进行处理，将碱部分分解使核糖容易游离（同5’-核糖核苷酸钠）。

④⑤（同5’-核糖核苷酸钠）。

⑥NH₃的检测界限约20μg。

⑦AS₂O₃为1ppm以下。

⑧Pb为10ppm以下。

⑨检测界限1μg。

⑩把混入的其它紫外线的吸收物质加以规定。

本品的Rf值是0.1g胞苷和胞嘧啶是0.67和0.75，确认限度分别为0.1μg。

144.6是ε：12，700，由试样的检液浓度0.02g/L的吸光度，到含量（%）的变换系数。