检验检测

3．5  5’-肌苷酸钠

sodium 5’-Inosinate

分子式CioH₁₁N₄Na₂O₈P                                          分子量392.17

本品在定量时含肌苷-5’-磷酸二钠（C₁₀H₁₁N₄Na₂O₈P）97~102%。

1．性状

本品为无色~白色的结晶体或者白色结晶性粉末，有特殊的味①。

2．鉴定试验

（1）取本品20mg，加0.01mol/L盐酸100mL，溶解，取10mL，加0.01mol/L盐酸定容至100mL溶液。在波长250±2nm时有极大的吸收区②。

（2）取本品的水溶液（3→10.000）3mL，加3.5-二羟甲苯乙醇溶液（1→10）0.2mL，然后加硫酸铁铵盐酸溶液（1→1，000）3mL，在水浴上加热10min，呈绿色③。

（3）取本品的水溶液（1→20）5mL，加镁试液2mL不生成沉淀。但加硝酸7mL，煮沸10min后，加氢氧化钠试液中和的溶液体呈磷酸盐的常规鉴定试验反应④。

（4）本品呈钠盐的常规鉴定试验反应。

3．纯度试验

（1）溶解性  将本品0.5g溶于10mL水时呈无色，其浊度接近透明。

（2）酸碱性  本品的水溶液（1→20）的pH值，用玻璃电极法测定时应是7.0~8.5。

（3）铵盐  将本品0.1g放入小试管中，加氧化镁50mg和水1mL，在试管内部将用水润湿的红色石蕊试纸挂好，盖好试管口，在水浴上加热5min时，试纸不应变蓝色⑤。

（4）砷  将本品0.5g溶于5mL水中以此为检液进行砷的常规试验，应符合要求⑥。

（5）重金属  取本品1g，加稀醋酸2mL和水20mL，以此为检液进行重金属的常规试验，其量应在0.002%以下。

（6）氨基酸  取本品的水溶液（1→1，000）5mL，加茚三酮试液1mL加热3min不能呈色。

（7）吸光度比  本品的0.01mol/L盐酸溶液（1→50，000）在波长250nm、260nm和280nm测定吸光度A1。

（8）其它核酸分解物  以本品的水溶液（1→200）1μL为检液，以丙酮、氨水和正-丙醇的混合液（2：5：6）为展开溶剂进行薄层层析时，只能发现一个斑点。但是，加入作为载体的硅胶（荧光剂）制成薄板。在110°干燥1h展开溶剂的前端，上升至比原线约高10cm时，停止展开，干后，在暗处、在紫外线（波长约250nm）下观察，不用对照液⑦。

4．水分

精确的称取本品约500mg，进行水分定量，其量应在28.5%以下。但是，需将试样装入干燥滴定烧瓶中，加费歇尔试剂用甲醇10mL，进而加一定量的费歇尔试剂使其过剩约10mL，加塞密封，搅拌20min后，用水·甲醇标准溶液滴定。另外，用同样方法进行空的试验⑧。

5．定量法

准确称取本品约500mg，加0.01mol/L盐酸至1,000mL。取此液10mL，加0.01mol/L盐酸至250mL作为检液。以0.01mol/L盐酸为对照液，用液层厚度1cm，波长250nm的测定吸光度A，按下式可求出肌苷-5’-磷酸二钠的含量⑨：

注  解

①本品是无色~白色的结晶或白色的结晶性粉末，无臭味，有木松鱼的鲜味，易溶于水。

②是鉴定次黄嘌呤。次黄嘌呤的UV吸收是λmax：250±2nm。

③是鉴定核糖。此种显色是利用加热从戊糖生成糠醛，一般3,5-二羟基甲苯盐酸盐。这里使用的是二羟基甲苯乙醇溶液。由亚铁离子增加呈色的灵敏度，λmax：660nm。

④是鉴定有机磷，首先用镁试液鉴定无机磷，存在于否，然后用硝酸加水分解后，用磷钼酸铵来鉴定磷。

⑤NH4的限度是0.02%。

⑥AS₂O₃的限量为2ppm。

⑦作为本品的杂质有肌苷，次黄嘌呤等。用本法时在另外位置上出现斑点故可以确认。例用本法的Rf值表示如下：5’-肌苷酸是0.29、肌苷0.61、次黄嘌呤0.64。另外鉴定限量5’-肌苷酸是0.2μg，肌苷，次黄嘌呤分别为0.05μg，比纸层析法远为优越。

⑧本品结晶时吸收6~8分子的结晶水趋于稳定。此时水分理论值是21.6~26.9%，考虑有若干吸附水，所以规定在28.5%以下。

⑨本法是溶在稀薄盐酸（pH值2）中，测定UV吸收可直接定量。测定波长选定接近最大吸收波长的250nm分子吸光系数采用12，160求其含量。另外，本品作为无水物定量，换算成含水物，这时水分含量用前项费歇尔法求出的值。