检验检测

2．2  柠檬酸

Citric Acid

分子式C₆H₈O₇·H₂O                                               分子量210.14

本品含柠檬酸（结晶）（C₆H₈O₇·H₂O）99.5~102.0%。

1．性状

本品为无色透明的结晶粒、块或白色的结晶性粉末，无臭，有很强的酸味①。

2．鉴定试验

（1）本品的水溶液（1→10）呈酸性。

（2）本品呈柠檬酸盐的常规鉴定试验反应②。

3．纯度试验

（1）硫酸盐  取本品0.5g，进行硫酸盐常规试验时，其量应在0.005mol/L硫酸0.5mL的对应量以下③。

（2）草酸盐  将本品1g溶于10mL水，加氯化钙试液2mL时，不发生混浊④。

（3）重金属  在强烈残留物试验所得到的残留物中加盐酸1mL和硝酸0.2mL，在水浴上蒸发至干，然后加稀盐酸1mL和水15mL，加热溶解，冷却后加酚酞试液1滴，然后滴加氨水至液体呈微红色后，加稀醋酸2mL，如有必要可进行过滤。然后加水至50mL，加硫化钠试液2滴，放置5min后，溶液颜色，不应比在铅标准溶液2mL中加稀醋酸2mL及水定容至50mL，再加2滴硫化钠试液，放置5min后的液体颜色深⑤。

（4）钙  将本品1g溶于10mL水，用氨水中和后，加草酸铵试液1mL时，不混浊⑥。

（5）硫酸呈色物  取本品0.5g，加硫酸5mL，约在90℃加热溶解，溶液颜色不应比比色标准溶液K深⑦。

（6）多环芳香族碳氢化合物  取本品25g，加水30mL，约在50℃加热溶解，冷却后分别取正已烷（用于紫外吸收谱测定）20mL重复3次抽提，以每分钟2,5000~3,000转离心10min将正己烷层合并后蒸馏，浓缩到1~2mL，冷却后加正己烷（紫外吸收谱测定用）定容至10mL，作为检液。将检液在液层为1cm时测定吸光率，波长范围在260~350nm时，所测值应是0.5以下。但对照液要加水30mL，分别取己烷20mL反复进行抽提3次，与以下试样的场合一样可以使用处理液⑧。

（7）异柠檬酸  将本品0.5g在105℃加热3h，冷却后溶解到10mL丙酮中，取其0.005mL为检液，进行纸层析第1法时，只应出现一个斑点。但是使用纸层析法2号时，当展开剂上升到约25mL时，停止展开。风干后用溴酚酞试液（柠檬酸用）喷雾，不用对照液。而且展开溶剂正丁醇、甲酸及水的混液（8：3：2）放置后，取其上层⑨。

4．强热残留物

取本品2g进行强热残留物试验时，其量应在0.1%以下。

5．定量法

精确称取本品大约1.5g，溶于水，定容至250mL，取其25mL用0.1mol/L氢氧化钠溶液滴定（指示剂：酚酞2~3滴）。

0.1mol/L氢氧化钠溶液1mL=7，005mg C₆H₈O₁₇·H₂O

注  解

①本品是具有1个分子结晶水的斜方晶系棱柱体，在干燥空气中结晶。风化失水，在湿的空气中慢慢潮解。易溶于水，也易溶于乙醇，但难溶于其他有机溶剂。

②氧化生成丙酮二羧酸与费歇尔试剂反应，生成不溶性的汞络盐C₅H₄O₃Hg·Hg（OHg）2SO₄沉淀。或者利用柠檬酸钙盐在冷时溶解，热时难以溶解等而加以鉴定。

③对制造时使用硫酸进行检验，主要是要对硫酸盐（主要是钙盐）或者游离状态时混入的进行检验。

④因异常发酵可生成草酸，有时精制时为除去钙盐要加草酸，故对混入的草酸要进行检验。

⑤制造时由于使用了包铅的容器所以要对其混往返铅进行试验。铅的限度为10ppm以下。

在有柠檬酸辣的条件下进行试验时，由于有机酸自体的螯合作用和杂质的影响，很难得到准确的数值。拟订 进行灰化，要尽量减少不良影响后再进行试验。

⑥对原料带入的柠檬酸钙要进行检验。

⑦对酒石酸及混入的糖要进行检验。含酒石酸带有褐色，当含有约0.04%的葡萄糖时，就形成比色标准溶液K的色泽。

⑧以正构烷烃为原料用发酵法生产的柠檬酸，有必要对可能从原料的石油中转移来的多环芳香族碳氢化合物进行试验。柠檬酸在260~360nm波长范围内几乎不吸收紫外线。利用本法的测验界限苯甲芘约是10ppb。

⑨异柠檬酸和柠檬酸都与TCA循环有关系，所以在食品中，如啤酒（1.04~5.16mg/100mL）、黑草莓（0.29%）、菜芽等中都含有少量。以正构烷烃为原料生产柠檬酸时，产生少量的副产物异柠檬酸。

异柠檬酸照原样很难检测出，要先加热处理变成内酯，此时柠檬酸不变化。

生成的柠檬酸内酯用纸层析法检测。柠檬酸内酯的Rf值为0.54，柠檬酸、异柠檬酸是0.37。本法的检测界限对异柠檬酸为0.4%。